美國(guó)首先將LT法（鱟變形細(xì)胞溶解物試驗(yàn)）作為檢測(cè)內(nèi)毒素的法定方法。在美國(guó)藥典第20版（1980）的細(xì)菌內(nèi)每素一項(xiàng)中對(duì)LT法亦進(jìn)行了詳細(xì)的介紹。繼美國(guó)以后，許多國(guó)家（特別是歐洲國(guó)家）紛紛仿效，亦已將LT法作為檢測(cè)內(nèi)毒素的法定方法?，F(xiàn)以美國(guó)為例，來說明這種法定的LT法。

美國(guó)食品藥品管理局（FDA）對(duì)廠家提出了一條準(zhǔn)則。FDA認(rèn)為對(duì)于應(yīng)用于人類的藥物、生物制劑、獸用藥物及醫(yī)療器械必須將LT法作為法定的終產(chǎn)品（end product）內(nèi)毒素檢測(cè)方法，廠家只有遵循這個(gè)原則并按介紹的方法操作后，其產(chǎn)品才能得到FDA的承認(rèn)。

LT法作為法定的內(nèi)毒素檢測(cè)方法，在進(jìn)行測(cè)定時(shí)必需作①測(cè)定鱟試劑的敏感性；②抑制與增強(qiáng)試驗(yàn)。

1.鱟試劑的敏感性

在鱟試驗(yàn)的操作過程中，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間必定有差異。檢測(cè)人員必須應(yīng)用同一批鱟試劑及同一批內(nèi)毒素作4~8個(gè)稀釋度的試驗(yàn)，以2倍倍比稀釋以便取得適宜的終點(diǎn)范圍作LT。終點(diǎn)內(nèi)毒素量應(yīng)以ng/ m1表示，然后換算成log值，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差（SD）。如果4個(gè)稀釋度的SD值小于或等于SD值的99%限值，則此方法是可用的。如SD超過比值，則應(yīng)采用8個(gè)稀釋度的試驗(yàn)，計(jì)算新的SD值。此時(shí)，如SD值仍超過8個(gè)稀釋度SD的99%上限值，則此方法由于變異太大不能采用。在重新試驗(yàn)前應(yīng)找出原因并進(jìn)行糾正。

如實(shí)驗(yàn)室通過了上述變異試驗(yàn)，則應(yīng)以一系列濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（RSE）或?qū)φ諛?biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（CSE）檢查鱟試劑的敏感性，如果鱟試劑的敏感性差異不超過標(biāo)定值的2倍稀釋，則認(rèn)為是滿意的。

2.抑制與增強(qiáng)試驗(yàn)

一種藥物含不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素（敏感性以鱟試劑標(biāo)定》，然后與水中的一系列同種內(nèi)毒素濃度進(jìn)行比較。標(biāo)準(zhǔn)系列的內(nèi)毒素檢測(cè)結(jié)果與藥物中的內(nèi)毒素檢測(cè)含量進(jìn)行比較，其差異不應(yīng)超過兩倍稀釋濃度。原則說明此種藥物有抑制或增強(qiáng)現(xiàn)象。

由不同濃度不同活性要素組成，而其它成分相對(duì)恒定的藥物，只需測(cè)最高和低濃度即可，如果每種濃度均表明有抑制或增強(qiáng)，則每種濃度均需進(jìn)行抑制/增強(qiáng)試驗(yàn)。

所有法定的藥物檢測(cè)均需在未稀釋或在適當(dāng)稀釋后測(cè)定。稀釋倍數(shù)不能超過最大有效稀釋（Maxium Valid Dilution，MVD），否則其中的內(nèi)毒素經(jīng)稀釋后濃度過低而不被LT法檢出。

如果藥物表明有抑制或增強(qiáng)現(xiàn)象，則應(yīng)服從RT法。此時(shí)，RT法仍將是檢測(cè)藥物內(nèi)毒素含量的適宜方法。至少應(yīng)檢測(cè)3個(gè)生產(chǎn)批次終產(chǎn)品的抑制及增強(qiáng)試驗(yàn)。如果藥物的加工制造過程改變，或藥物的配方或藥物中某種特殊要素的來源改變，則每種藥物至少要對(duì)3種單位重復(fù)測(cè)定抑制/增強(qiáng)試驗(yàn)。如鱟試劑的生產(chǎn)或鱟試劑批號(hào)更變時(shí)，至少每種藥品要對(duì)1種單位進(jìn)行重復(fù)測(cè)定。